Palabras clave
INTRODUCCIÓN
La miocardiopatía hipertrófica es una enfermedad cardiaca caracterizada por hipertrofia ventricular, generalmente del ventrículo izquierdo, con marcada afección, en la mayoría de los casos, del tabique interventricular en ausencia de otras causas que justifiquen la hipertrofia. La prevalencia de la enfermedad en diferentes poblaciones es de 1:500-6001,2. Se trata de una enfermedad de herencia mendeliana autosómica dominante, aunque la penetrancia varía según el gen mutado.
Se ha identificado hasta ahora 12 genes relacionados con la enfermedad, de los que 9 codifican proteínas del sarcómero cardiaco3-10. En total, más de 150 mutaciones distintas son la causa primaria de la enfermedad. En series amplias de pacientes de origen europeo y norteamericano, el gen MYH7b es el que se asocia más frecuentemente a miocardiopatía hipertrófica (MCH). De esos estudios se deduce que aproximadamente un 20-30% de los pacientes con MCH tienen una mutación en ese gen.
El objetivo del presente estudio es analizar la secuencia del gen MYH7b en una serie de pacientes españoles con MCH para intentar establecer la frecuencia y el tipo de mutaciones de ese gen en nuestro entorno.
MÉTODOS
Pacientes
Se ha incluido en este estudio a 144 individuos pertenecientes a 36 familias con al menos un enfermo de miocardiopatía hipertrófica. Los criterios diagnósticos para su inclusión en el estudio fueron la demostración de un espesor de la pared del ventrículo izquierdo o del septo interventricular igual o superior a 13 mm (en adultos) en ausencia de otras causas de hipertrofia ventricular11. Para el diagnóstico de los familiares en primer grado de los pacientes afectados, además se consideró diagnóstica la demostración de hipertrofia ventricular izquierda leve (< 13 mm de espesor) asociada a alteraciones del ECG, como ondas Q anormales o inversión muy marcada de la onda T. Los pacientes analizados, 24 varones y 12 mujeres de entre 3 y 79 años de edad, procedían de los servicios de cardiología de hospitales de Madrid; 33 familias eran españolas de origen y 3 pacientes procedían de Marruecos y eran de origen árabe. Se había realizado a todos los pacientes al menos un ecocardiograma durante su enfermedad. Se pidió a los pacientes el consentimiento informado, según los requisitos para realizar estudios genéticos de la Comisión de Ética del Hospital Universitario La Paz.
Análisis genéticos
El gen de la cadena pesada de la betamiosina cardiaca (gen MYH7b) se secuenció en un paciente de cada familia. El procedimiento para la secuenciación fue como sigue: los exones 3 a 24, ambos inclusive, junto con las regiones intrónicas adyacentes, se amplificaron por separado mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) del ADN. Se secuenció las 2 hebras del ADN siguiendo el método de Sanger. Se comparó las secuencias resultantes con la almacenada en la base de datos de secuencias de ADN del NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez) correspondiente a la del gen MYH7b (ref. NT_026437).
De las familias en que se pudo estudiar a varios de sus componentes, se analizó 2 marcadores microsatélites intragénicos al gen MYH7b, MYO I y MYO II12, con el objetivo de determinar si este gen estaba o no relacionado con la enfermedad.
RESULTADOS
De los pacientes incluidos en este estudio, 18 tenían antecedentes de MCH y 18 eran de presentación esporádica. El análisis de los marcadores polimórficos MYO I y MYO II del gen permitió descartar que mutaciones en el gen MYH7b fueran la causa de la enfermedad en 6 de las familias. En el resto de las familias (30 pacientes) se trataba de formas esporádicas o el número de individuos en la familia no permitía el análisis de segregación de alelos y su correlación con las manifestaciones clínicas. Por ello, en estos 30 pacientes, el análisis del gen se realizó por secuenciación del ADN de las regiones del gen donde aparecen con mayor frecuencia mutaciones causantes de la enfermedad13. La secuenciación desde el exón 3 al exón 24 del gen MYH7b de estos 30 pacientes permitió la identificación de 2 mutaciones en 2 de estas familias. Uno de los pacientes (AF) es portador en heterocigosis de la mutación Arg858Cys, que causa un cambio neto de carga en la proteína de +1 a 0 y no está presente en 100 cromosomas de individuos sanos. Este paciente, de 53 años, es un caso de presentación familiar de MCH obstructiva (fig. 1; individuo II.1). Su madre y un hermano menor también tienen la enfermedad.
Fig. 1. Árbol familiar del paciente AF, que es portador de la mutación R858C en el gen MYH7b.
La otra mutación encontrada es Met515Val, no descrita anteriormente, aunque se ha descrito mutaciones similares cercanas14 e incluso del mismo residuo aminoacídico15. El paciente de 27 años, varón de origen marroquí, presenta una hipertrofia septal asimétrica severa no obstructiva (septo de 27 mm) y síncopes de repetición.
DISCUSIÓN
La miocardiopatía hipertrófica se asocia con frecuencia a mutaciones en el gen MYH7b, que codifica la cadena pesada de la betamiosina cardiaca. En este trabajo, la secuenciación del ADN de más del 80% del gen MYH7b, que incluye las regiones donde se localizan con mayor frecuencia mutaciones de este gen, ha dado como resultado la identificación de 2 mutaciones en un total de 36 (5,5%) familias. Una de las mutaciones (Arg858Cys) ha sido descrita recientemente por Van Driest et al15, si bien los autores no dan datos sobre la clínica del paciente. El aminoácido arg858 se ha conservado a lo largo de la evolución, lo que lo hace funcionalmente relevante (fig. 2B). La otra mutación encontrada en esta serie de pacientes es Met515Val. La estricta conservación de la metionina 515 (fig. 2A) indica que la mutación puede alterar la función de la proteína.
Fig. 2. Secuencias de aminoácidos de la cadena polipeptídica de la cadena pesada de la betamiosina cardiaca humana, que muestran la conservación de los aminoácidos metionina 515 (A) y arginina 858 (B).
De los resultados de este análisis se puede concluir que las mutaciones en el gen MYH7b en la población española de enfermos de MCH son poco frecuentes, al contrario de lo que ocurre en otras poblaciones caucásicas. Al igual que en otros estudios en los que la población con miocardiopatía hipertrófica estudiada procedía del ámbito hospitalario, no se puede descartar un sesgo de selección respecto a la población general de pacientes con miocardiopatía hipertrófica, en la que muchos de los pacientes ni siquiera están diagnosticados.
Este resultado tiene implicaciones para establecer estrategias en el diagnóstico y el consejo genético en familias afectadas por esta enfermedad.
AGRADECIMIENTOS
Agradecemos a las familias con miocardiopatía hipertrófica su participación; a B. Ejarque, su ayuda en la purificación del ADN; a D. Arjona y C. Amiñoso, su ayuda en la secuenciación del ADN, y a M.J. Mazón, la lectura crítica del manuscrito. Asimismo agradecemos a los profesionales médicos su colaboración en el estudio clínico de los pacientes.
Este trabajo ha sido financiado parcialmente por una Ayuda para la Realización de Proyectos Coordinados de Investigación en Ciencias de la Salud de la Comunidad de Madrid, expediente 08.4/0035/98, y por una Beca de la Fundación MAPFRE Medicina 2005 en el Área Cardiovascular.
Correspondencia: Dr. J. Molano.
Unidad de Genética Molecular. Servicio de Bioquímica.
Hospital Universitario La Paz.
P.o de la Castellana, 261. 28046 Madrid. España.
Correo electrónico: jmolano.hulp@salud.madrid.org
Recibido el 20 de julio de 2005.
Aceptado para publicación el 26 de enero de 2006.